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    液相色谱法测定生物发酵产品中腺苷的含量

    更新时间:2016-10-21      点击次数:2403

    液相色谱法测定生物发酵产品中腺苷的含量

    本方法适用于虫草、菌粉、灵芝等产品系列发酵产品

    1 仪器与试剂

    1.1仪器配置

    等度系统

    具体配置

    数量

    备注

    LC-500高压输液泵

    1

     

    SPD-500紫外检测器

    1

     

    7725i手动进样阀

    1

     

    色谱工作站

    1

     

    C18色谱柱 250*4.6  5um

    1

     

    平头进样针

    1

     

    前处理设备

    超声波脱气机

    1

     

    溶剂过虑装置

    1

     

    真空泵

    1

     

    溶剂过滤头

     

    有机/水系

    1.2试剂                                                      

    腺苷对照品含量≥99.0

    色谱纯甲醇,水为超纯水其他为分析纯。

    2 方法与结果

    2.1 色谱条件

    色谱柱 C18(250 mm × 4.6 mm,5μm)

    流动相:甲醇:磷酸盐缓冲液(pH 6.5) = 10:1

    流速为1.0 ml /min

    检测波长为260nm

    柱温为室温,进样量为20 μl

    2.2 供试品溶液的制备

    取拟青霉约1.0g,精密称定,置于50 ml 量瓶,加入20% 甲醇定容至50 ml,密塞,称定重量,超声20min,放至室温后称重,用甲醇补足减失的重量。用0. 45 μm 微孔滤膜滤过后供分析。

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