高效液相色谱法测定生物发酵产品中成分腺苷的含量

本方法适用于虫草、菌粉、灵芝等产品系列发酵产品

1 仪器与试剂

1.1仪器

高效液相色谱仪( LC-500A) 配SPD-500紫外检测器

N2000色谱工作站；

超声波清洗器，十万分之一天平；

1.2试剂                                          

腺苷对照品含量≥99.0

色谱纯甲醇，水为超纯水其他为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱 C18( 150 mm × 4.6 mm，5μm)

流动相：甲醇：磷酸盐缓冲液（pH 6.5） = 10：1

流速为1.0 ml /min

检测波长为260nm；柱温为室温；进样量为10 μl。

2.2 供试品溶液的制备

取拟青霉约1.0g，精密称定，置于50 ml 量瓶，加入20% 甲醇定容至50 ml，密塞，称定重量，超声20min，放至室温后称重，用甲醇补足减失的重量。用0. 45 μm 微孔滤膜滤过后供分析。

                                                                      腺苷标准品谱图

               拟青霉样品谱图

                                                        头孢菌样品谱图

3. 液相色谱仪器配置