液相色谱流动相使用前为什么要脱气？脱气有什么作用？如何脱气？脱气不足可能造成哪些异常现象？

（1）脱气的必要性：

a.气泡会增加基线的噪声，造成灵敏度下降，甚至无法分析（噪声增大，基线不稳，突然跳动）。

b.溶解的氧气还会导致样品中某些组份被氧化，溶解的氧气与色谱柱中固定相（如烷基胺）发生反应，柱效降低从而改变柱的分离性能。

c.溶解氧能与某些溶剂（如甲醇、四氢呋喃）形成有紫外吸收的络合物，络合物会提高背景吸收（特别是在260nm以下），并导致检测灵敏度的轻微降低，会在梯度淋洗时造成基线漂移或形成鬼峰（假峰）。

d.若用FLD（荧光检测器），溶解氧在一定条件下还会引起淬灭现象，特别是对芳香烃、脂肪醛、酮等。在某些情况下，荧光响应可降低达95%。

（2）脱气的作用：

a.除去其中溶解的气体（如O2），以防止在洗脱过程中当流动相由色谱柱流至检测器时，因压力降低而产生气泡。

b.排出气泡能减少泵工作的伤害，提高检测器的性能高，改善灵敏度。

（3）脱气的方式：

a.加热回流法：效果较好，但操作复杂，且有毒性挥发污染，同时需要考虑低沸点溶剂挥发造成的组成变化。

b.抽真空脱气法：缺点是易抽走有机相。

c.超声脱气法：流动相放在超声波容器中（一般500mL溶液需超声20~30min），此法不影响溶剂组成。超声时应注意避免溶剂瓶与超声槽底部或壁接触，以免玻璃瓶破裂，容器内液面不要高出水面太多。

d.氦气脱气法：在色谱操作前和进行时，将惰性气体喷入溶剂中。严格来说，此方法不能将溶剂脱气，它只是用一种低溶解度的惰性气体（通常是氦）将空气替换出来。主要利用液体中氦气的溶解度比空气低，连续吹氦脱气，效果较好，但成本高。

e.在线真空脱气法：利用在线脱气机在线脱气，智能控制，无需额外操作，成本低，脱气效果明显优于以上几种方法，并适用于多元溶剂体系。